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Cas13a蛋白定量检测试剂盒解决方案

发布者:亚博7797科技    发布时间:2021-09-29     
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【前情回顾】Cas9蛋白定量检测试剂盒解决方案

 

说起(qi)DNA编辑(ji),你会想到CRISPR/Cas9,那(nei)RNA编辑(ji)呢?今天就带大家认识(shi)一下RNA剪刀(dao)手CRISPR/Cas13a。

 

DNA编辑.jpg

 

2017年10月,张锋实验室首先证实CRISPR/Casl3a可靶向编辑哺乳(ru)动物(wu)体(ti)内RNA。比起RNAi,Casl3a有着更强的(de)特(te)异性(xing),并且由于其对哺乳(ru)动物(wu)细胞而言是(shi)非内源性(xing)的(de),因此扰乱(luan)细胞中天然的(de)转录后网(wang)络的(de)可能(neng)性(xing)极(ji)低。大家都(dou)知道(dao),Cas9是(shi)利用(yong)tracrRNA和crRNA来(lai)实现(xian)与(yu)DNA目(mu)标(biao)的(de)结合(he)和切(qie)割。不(bu)过,Cas13a(也叫C2c2)只需要(yao)24个碱(jian)基的(de)crRNA,它通过富含尿嘧啶的(de)茎(jing)环(huan)结构与(yu)Cas13a分子(zi)相互作(zuo)用(yong),并通过Cas13a的(de)一系列构象变(bian)化来(lai)促进RNA目(mu)标(biao)的(de)切(qie)割。

RNA目标的切割.jpg

 

Cas13a是(shi)VI型CRISPR-Cas系(xi)统效应蛋白(bai),具有RNA介导的RNA酶(mei)切活性能靶向(xiang)并(bing)切割与crRNA互补(bu)的RNA,该编辑系(xi)统作(zuo)为(wei)一种新兴(xing)的治(zhi)疗和诊断工具,在病(bing)毒(du)性疾病(bing)和癌(ai)症(zheng)等领(ling)域受到越来越多的关注。

 

如何快速有效的实现Cas13a蛋白的定量检测,作为专业的生命科学医药原料供应商,Cell Biolabs中国区金牌代理,艾美捷(jie)为您推荐:Cas13a蛋白ELISA检测试剂盒,实现Cas13a蛋白的定量检测。

 

货号PRB-5091
名称Cas13a (CRISPR Associated Protein 13a, C2c2) ELISA Kit
Cas13a 蛋白ELSIA检测试剂盒
检测灵敏度沙氏纤毛菌的Cas13a蛋白检测极限为31pg/mL
实验原理本试剂盒用于测量各种细胞和组织裂解液样本中沙氏纤毛菌的Cas13a蛋白的含量。试剂盒提供包被有抗Cas13a蛋白抗体的96孔板,在使用该试剂盒的测定中,样品中的Cas13a蛋白牢固且稳定地结合在孔上。然后加入生物素标记的Cas13a蛋白检测抗体和显色剂进行识别并显色。Cas13a的比例与吸光度的强度成比例。Cas13a的绝对量可以通过与Cas13a标准品进行比较来量化。
说明书

 

Cas13a 蛋白ELSIA检测试剂盒实验结果:

Cas13a-1.png

图1. Cas13a标准曲线

 

Cas13a-2.png

图2. 纯化的Cas13a重组蛋白。 泳道 1:SeeBlue Plus2 MW 标准品; 泳道2:重组Cas13a蛋白

 

重组的Cas13a蛋白的序列(下划线部分是用来免疫生产试剂盒抗体的序列):

MGNLFGHKRWYEVRDKKDFKIKRKVKVKRNYDGNKYILNINENNNKEKIDNNKFIRKYINYKKNDNIL KEFTRKFHAGNILFKLKGKEGIIRIENNDDFLETEEVVLYIEAYGKSEKLKALGITKKKIIDEAIRQG ITKDDKKIEIKRQENEEEIEIDIRDEYTNKTLNDCSIILRIIENDELETKKSIYEIFKNINMSLYKII EKIIENETEKVFENRYYEEHLREKLLKDDKIDVILTNFMEIREKIKSNLEILGFVKFYLNVGGDKKKS KNKKMLVEKILNINVDLTVEDIADFVIKELEFWNITKRIEKVKKVNNEFLEKRRNRTYIKSYVLLDKH EKFKIERENKKDKIVKFFVENIKNNSIKEKIEKILAEFKIDELIKKLEKELKKGNCDTEIFGIFKKHY KVNFDSKKFSKKSDEEKELYKIIYRYLKGRIEKILVNEQKVRLKKMEKIEIEKILNESILSEKILKRV KQYTLEHIMYLGKLRHNDIDMTTVNTDDFSRLHAKEELDLELITFFASTNMELNKIFSRENINNDENI DFFGGDREKNYVLDKKILNSKIKIIRDLDFIDNKNNITNNFIRKFTKIGTNERNRILHAISKERDLQG TQDDYNKVINIIQNLKISDEEVSKALNLDVVFKDKKNIITKINDIKISEENNNDIKYLPSFSKVLPEI LNLYRNNPKNEPFDTIETEKIVLNALIYVNKELYKKLILEDDLEENESKNIFLQELKKTLGNIDEIDE NIIENYYKNAQISASKGNNKAIKKYQKKVIECYIGYLRKNYEELFDFSDFKMNIQEIKKQIKDINDNK TYERITVKTSDKTIVINDDFEYIISIFALLNSNAVINKIRNRFFATSVWLNTSEYQNIIDILDEIMQL NTLRNECITENWNLNLEEFIQKMKEIEKDFDDFKIQTKKEIFNNYYEDIKNNILTEFKDDINGCDVLE KKLEKIVIFDDETKFEIDKKSNILQDEQRKLSNINKKDLKKKVDQYIKDKDQEIKSKILCRIIFNSDF LKKYKKEIDNLIEDMESENENKFQEIYYPKERKNELYIYKKNLFLNIGNPNFDKIYGLISNDIKMADA KFLFNIDGKNIRKNKISEIDAILKNLNDKLNGYSKEYKEKYIKKLKENDDFFAKNIQNKNYKSFEKDY NRVSEYKKIRDLVEFNYLNKIESYLIDINWKLAIQMARFERDMHYIVNGLRELGIIKLSGYNTGISRA YPKRNGSDGFYTTTAYYKFFDEESYKKFEKICYGFGIDLSENSEINKPENESIRNYISHFYIVRNPFA DYSIAEQIDRVSNLLSYSTRYNNSTYASVFEVFKKDVNLDYDELKKKFKLIGNNDILERLMKPKKVSV LELESYNSDYIKNLIIELLTKIENTNDTL

 

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